3、洁净室原理、构成及分类
3.1、防止微尘直接侵入室内
1）、维持室内正压，防止空气由低级别向高级别洁净室渗入。
2）、确保室内密封措施，空气经过滤器过滤。
3.2、防止微粒子堆积
1）、室内围护无死角、沟缝，边角圆弧过道。
2）、定期清扫。
3.3、尽量防止微粒的产生
1）、避免使用易产尘原材料、围护结构等。
2）、制定详细洁净规程，降低人体及生产过程的产尘量。
3）、提高生产设备的自动化程度。
3.4、把室内发生的尘粒有效、迅速地排除
1）、利用过滤器，循环过滤室内尘粒。
2）、保证足够的循环风量及合理的气流组织。
3.5、洁净室的构成
无菌室净化工程特点要求：
(1)无菌室应封闭，进出无菌室至少要经两道门，中间隔有缓冲间，无菌室与外间设置一个可开闭的窗口，用于传递器具。
(2)无菌室必须保持整洁。工作人员进入无菌室应换鞋、衣。无菌室使用前须用紫外线消毒30min，操作结束后清洁台面，再用紫外线消毒30min。定期用乳酸或甲醛熏蒸，消毒。
(3)无菌室仅用于培养基分装等无菌操作，不能进行有菌标本的操作。操作人员操作时应严格关门并戴好的口罩与帽子。
(4)无菌室内应有空气过滤装置，并安装空调。
正压通气
万级层流手术室不仅要求高度洁净的空气，而且要求能控制气流的流通方向，手术室内形成正压环境，使气流从洁净度高的手术区域流向洁净度低的区域，一股细小、薄层的气流，以均匀的流速向同一方向输送，并带走和排出气流中的尘埃颗粒和细a菌。目前，层流净化手术室分为垂直层流式和水平层流式两种。垂直层流式过滤器装在手术病床的正上方，气流垂直吹送，回风口设在墙面的四角，确保手术台洁净度达标，一般多采用垂直层流式效果较好。
单通道流向
医院在万级层流手术室与消毒柜之间制作了一堵墙，并设立进、出单通道，需消毒的物品经过“输出”通道直接从手术室转移到消毒柜，消毒后经过“输入”通道转移到手术室，这样避免了消毒物品在转移的过程中二次污染。
器材及场所的灭菌消毒编辑
微生物检验用器材及场所必须进行灭菌或消毒处理，不同的对象采用不同的处理方法
1． 高压蒸汽灭菌: 工作服、口罩、稀释液等，置高压杀菌锅内，一般采用121℃灭菌半小时,当然不同的培养基有不同的要求,应分别处理
2． 火焰灭菌：接种针、接种环等可直接火焰灭菌
3． 高温干燥灭菌： 各种玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃灭菌2小时
4． 一 般消毒: 无菌室内的凳、工作台、试管架、天平、待检物容器或包装均无法进行灭菌，必须用其他方法进行消毒处理，采用2%石炭酸或来苏儿水溶液擦拭消毒，工作人员的手也用此法进行消毒
5． 空气的消毒： 开启紫外灯照射30—60分钟 即可。
操作要领编辑
准备工作
1． 先进行无菌室空间的消毒，开启紫外灯30—60分钟
2． 检验用的有关器材， 搬入无菌室前必须分别进会灭菌消毒
3． 操作人员必须将手清洗消毒，穿戴好无菌工作衣、帽和鞋，才能进入无菌室
4． 进入无菌室后再一次消毒手部，然后才进行检验操作
操作过程注意事项
1． 动作要轻，不能太快，以免搅动空气增加污染；玻璃器皿也应轻取轻放，以免破损污染环境
2． 操作应在近火焰区进行。
3． 接种环、接种针等金属器材使用前后均需灼烧，灼烧时先通过内焰，使残物烘干后再灼烧灭菌
4． 使用吸管时，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必须用洗耳球操作。
5． 观察平板时不好 开盖，如欲沾取菌落检查时，必需靠近火焰区操作，平皿盖也不能 大开，而是上下盖适当开缝。
6． 进行可疑致病菌涂片染色时，应使用夹子夹持玻片，切勿用手 直接拿玻片，以免造成污染，用过的玻片也应置于消毒液中浸泡消毒，然后再洗涤。
7． 工作结束，收拾好工作台上的样品及器材，后用消毒液擦拭工作台。
洁净室气流组织
送风气流应以短距离，不受污染地直接送到工作区，并且尽量覆盖工作区，使污染物在扩散之前被携带到回风口。尽量减少涡流，避免把工作区以外的污染物带入工作区。尽量控制气流的上升，防止造成二次污染。工作区的气流尽量均匀。主要分为单向流洁净室（层流）及非单向流洁净室（乱流）。
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