无菌室的使用与管理编辑
（1） 无菌室应保持清洁整齐，室内仅存放必须的检验用具如酒精灯、酒精棉、火柴、镊子、接种针、接种环、玻璃铅笔等。&不要放与检测无关的物品
（2） 室内检验用具及凳桌等保持固定位置，不随便移动。
（3） 每2—3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作台、门、窗、桌、椅及地面，然后用3%石炭酸水溶液喷雾消毒空气，后紫外灯杀菌半小时
（4） 定期检查室内空气无菌状况，细菌数应控制在10个以下，发现不符合要求时，应立即消毒灭菌。/无菌室无菌程度的测定方法：取普通肉汤琼脂平板、改良马丁培养基平板各3个（平板直径均9厘米），置无菌室各工作位置上，开盖曝露半小时，然后倒置进行培养，测细菌总数应置37℃温箱培养48小时；测霉菌数则应置27℃温箱培养5天。细菌`霉菌总数均不得超过10个为 。
（5） 无菌室杀菌前，应将所有物品置于操作之部位（待检物例外），然后打开紫外灯杀菌30分钟，时间一到，关闭紫外灯待用
（6） 进入无菌室前，必须于缓冲间更换消毒过的工作服、工作帽及工作鞋。
（7） 操作应严格按照无菌操作规定进行，操作中少说话，不喧哗，以保持环境的无菌状态。
(8)吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管，如吸管碰到手及其它未灭菌的物体，必须重 新 更 换 ，以 防污染 。
(9) 接种针每次使用前后，必须通过火焰燃烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物 。
(10)带有菌液的吸管、试管等器皿应浸泡在盛有5%的来苏儿溶液的消毒桶内消毒，24h 取出冲洗;培养皿则需在高压灭菌器中重新灭菌后方可处理营养基，切记不要直接冲入下水道中，防止阻塞。如有菌液洒在桌上或地上，应立即用 5%石碳酸溶液或 3%的来苏儿倾覆在被污染处至少 30min，再做处理，工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤 。 [2]

改革开发以来，随着外资及民营企业的迅速发展，洁净空调技术在微电子工业、医药卫生及食品工业等行业得到了广泛的应用，越来越多生产工艺工程师、工程技术人员接触并认识了洁净室。洁净室的相关从业人员也呈现几何数级增长，但是多数并未真正认识到洁净室的具体应用。
1、污染物质
了解洁净室首先需要了解污染物，洁净室技术的主要控制对象就是对室内洁净环境产生影响的室外污染物质，包括粉尘、烟、烟雾、化学污染物、微生物等。对大气尘来说，其中小于1μm的粒子数约占总粒子数的99%，但其质量分数约占3%；10μm以上的粒子数很少，但其质量分数可达80%，一般要求的洁净室关注的是0.5μm的粒子，浓度检别采用计数法。
污染物的来源分室外大气及室内产尘，其中室内产尘人是主要控制对象，人活动时的发尘量比静止时大好几倍。参考如下表：
2、洁净度级别
洁净室的级别的选择，对业主的投资预算有至关重要的影响。业主、设计方、施工承包商都必须了解规范或ISO标准中那些不必要的变量、因素对于花费的影响。
国际污染物控制学会联盟（ICCCS） 协调国际标准化组织（ISO）早已制定了ISO-14644标准，我国采用的GB50073-2001洁净室级别标准与IS0标准是一致的。故建议各从业人员从FS-209E对洁净室级别的表述转变为ISO标准或国标标准，参考如下表。
生物洁净室是在工业洁净室的基础上发展起来的，所以其标准也往往以工业洁净室标准为基础，再规定空气中允许的微生物浓度。现有标准允许的细菌浓度包括浮游菌浓度及沉降菌浓度两种。参考以下GMP标准。

工作人员进入无菌实验室要穿无菌衣、帽、口罩和鞋，非工作人员不得随意进入。

.无菌室应该有工作浓度的消毒液，并配备紫外灯进行空气消毒，定期使用适宜的消毒液灭菌清洁，无菌室设计，保证无菌室的洁净度符合要求。

无菌实验室要保持清洁，严禁堆放杂物，手术无菌室，以防止污染。每天要进行湿式小扫除，无菌室，每周大扫除，药厂无菌室，每月进行空气和试验台表面的xi菌学检测，各项指标控制在标准范围内。

要防止灭菌器材和培养基污染，已污染的就要停止使用；需要带入无菌实验室的仪器、平皿等物品都要包扎严密，并采用适宜的方法灭菌；供试拼在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以免污染，并消毒外表面。

无菌实验室要保持清洁，操作完毕后要清理无菌室，消毒、擦拭台面，不存放与实验无关的物品，再用紫外灯辐照灭菌。

无菌室一般为4 — 5 平方米、高 2.5 米的独立小房间（与外间隔离），专辟于微生物实验室内，可以用板材和玻璃建造。无菌室外要设一个缓冲间，错开门向，以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭、室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。在获得了无菌环境和无菌材料后，只有保持无菌状态，才能对某种特定的已知微生物进行研究。
注意事项
严格无菌操作，防止微生物污染；操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。
规程
1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到10000级，室内温度保持在18-24℃，湿度保持在45-65%。超净台洁净度应达到100级。
2.无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。
3.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。
4.无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5%的甲酚溶液，75%的酒精，0.1%的新洁尔灭溶液，等等。
5.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。
6.需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。
7.工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。
8.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌30分钟。
9.供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用75%的酒精棉球消毒外表面。
10.每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。
11.吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。
12.接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。
13.带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。
14.凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水下冲洗，严禁污染下水道。

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