操作过程注意事项
1． 动作要轻，不能太快，以免搅动空气增加污染；玻璃器皿也应轻取轻放，以免破损污染环境。
2． 操作应在近火焰区进行。
3． 接种环、接种针等金属器材使用前后均需灼烧，灼烧时先通过内焰，使残物烘干后再灼烧灭菌。
4． 使用吸管时，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必须用洗耳球操作。
5． 观察平板时不好 开盖，如欲沾取菌落检查时，必需靠近火焰区操作，平皿盖也不能 大开，而是上下盖适当开缝。
6． 进行可疑致病菌涂片染色时，应使用夹子夹持玻片，切勿用手 直接拿玻片，以免造成污染，用过的玻片也应置于消毒液中浸泡消毒，然后再洗涤。
7． 工作结束，收拾好工作台上的样品及器材，后用消毒液擦拭工作台。
（5） 无菌室杀菌前，应将所有物品置于操作之部位（待检物例外），然后打开紫外灯杀菌30分钟，时间一到，关闭紫外灯待用。
（6） 进入无菌室前，必须于缓冲间更换消毒过的工作服、工作帽及工作鞋。
（7） 操作应严格按照无菌操作规定进行，操作中少说话，不喧哗，以保持环境的无菌状态。
器材及场所的灭菌消毒
微生物检验用器材及场所必须进行灭菌或消毒处理，不同的对象采用不同的处理方法。
1． 高压蒸汽灭菌: 工作服、口罩、稀释液等，置高压杀菌锅内，一般采用121℃灭菌半小时,当然不同的培养基有不同的要求,应分别处理。
2． 火焰灭菌： 接种针、接种环等可直接火焰灭菌。
3． 高温干燥灭菌： 各种玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃灭菌2小时。
4． 一 般消毒: 无菌室内的凳、工作台、试管架、天平、待检物容器或包装均无法进行灭菌，必须用其他方法进行消毒处理，采用2%石炭酸或来苏儿水溶液擦拭消毒，工作人员的手也用此法进行消毒。
5． 空气的消毒： 开启紫外灯照射30―60分钟 即可。
准备工作
1． 先进行无菌室空间的消毒，开启紫外灯30―60分钟。
2． 检验用的有关器材， 搬入无菌室前必须分别进会灭菌消毒。
3． 操作人员必须将手清洗消毒，穿戴好无菌工作衣、帽和鞋，才能进入无菌室。
4． 进入无菌室后再一次消毒手部，然后才进行检验操作。
医院消毒技术规范标准操作流程
3.1消毒与灭菌方法
3.1.1 压力蒸汽灭菌
3.1.1.1 适用范围: 用于耐高温、耐高湿的医1疗1器1械和物品的灭菌。不能用于凡士林等油类和的灭菌。
3.1.1.2压力蒸汽灭菌器: 根据排放冷空气的方式和程度不同，分为下排气式压力蒸汽灭菌器和预真空压力蒸汽灭菌器二大类。
3.1.1.3下排气式压力蒸汽灭菌器
（1）灭菌原理: 利用重力置换原理，使热蒸汽在灭菌器中从上而下，将冷空气由下排气孔排出，排出的冷空气由饱和蒸汽取代，专业无菌洁净室，利用蒸汽释放的潜热使物品达到灭菌。
人净区内各功能房间应顺人净路线为：非洁净走廊、换鞋、一次更衣室、二次更衣室、缓冲间、洁净内走廊。
洁净室内走廊与非洁净区至少维持30Pa正压压差。
这种压差建立基本原理是送风量大于回风量、排风量、渗漏风量来维持正压。通过洁净室的送入风量与排风量+压差风量(余风量)之间达到平衡便建立压差。
对全新风空气系统：新风量=排风量+压差风量
对循环空气系统：新风量+回风量=回风量+排风量+压差风量
归根到底洁净室压差，即新风量=排风量+压差风量，它们之间平衡关系建立。
总之，设计、施工和调试是保证净化系统正常运行的三个重要环节，提供无菌洁净室，通过调试我们可以对系统运行中出现的问题有所了解，无菌洁净室厂家，从而可以完善设计方案，规范施工操作，避免以上问题的出现。调试工作是保证洁净室室内压差和洁净度是否达标的重要和必要环节。系统正常运行则属于正常的使用生产环节。
改革开发以来，随着外资及民营企业的迅速发展，洁净空调技术在微电子工业、医药卫生及食品工业等行业得到了广泛的应用，越来越多生产工艺工程师、工程技术人员接触并认识了洁净室。洁净室的相关从业人员也呈现几何数级增长，但是多数并未真正认识到洁净室的具体应用。
1、污染物质
了解洁净室首先需要了解污染物，洁净室技术的主要控制对象就是对室内洁净环境产生影响的室外污染物质，包括粉尘、烟、烟雾、化学污染物、微生物等。对大气尘来说，其中小于1μm的粒子数约占总粒子数的99%，但其质量分数约占3%；10μm以上的粒子数很少，但其质量分数可达80%，一般要求的洁净室关注的是0.5μm的粒子，浓度检别采用计数法。
污染物的来源分室外大气及室内产尘，其中室内产尘人是主要控制对象，人活动时的发尘量比静止时大好几倍。参考如下表：
2、洁净度级别
洁净室的级别的选择，对业主的投资预算有至关重要的影响。业主、设计方、施工承包商都必须了解规范或ISO标准中那些不必要的变量、因素对于花费的影响。
国际污染物控制学会联盟（ICCCS） 协调国际标准化组织（ISO）早已制定了ISO-14644标准，我国采用的GB50073-2001洁净室级别标准与IS0标准是一致的。故建议各从业人员从FS-209E对洁净室级别的表述转变为ISO标准或国标标准，参考如下表。
生物洁净室是在工业洁净室的基础上发展起来的，所以其标准也往往以工业洁净室标准为基础，再规定空气中允许的微生物浓度。现有标准允许的细菌浓度包括浮游菌浓度及沉降菌浓度两种。参考以下GMP标准。
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